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抗體質(zhì)量指標(biāo)有哪些?
來(lái)源：菲恩生物 發(fā)布時(shí)間：2019-06-03 11:42 點(diǎn)擊量：
抗體核心的基本屬性，包括抗體分子的結(jié)合特異性（在整個(gè)分子和表位水平上識(shí)別同一靶標(biāo)）、交叉反應(yīng)性（非靶標(biāo)反應(yīng)物和脫靶程度）、穩(wěn)定性等。
1.特異性又包括蛋白特異性、實(shí)驗(yàn)方法特異性和種屬特異性。目前普遍采用免疫原對(duì)宿主動(dòng)物進(jìn)行刺激誘導(dǎo)免疫反應(yīng)的方法生產(chǎn)抗體，免疫原可以是全長(zhǎng)蛋白、蛋白質(zhì)片段、多肽、整個(gè)生物體（例如細(xì)菌）或細(xì)胞等，這就需要確認(rèn)免疫原與您要檢測(cè)的蛋白區(qū)域一致或包含在其內(nèi)。例如，如果打算通過(guò)FACS檢測(cè)活細(xì)胞上的細(xì)胞表面蛋白，請(qǐng)選擇由蛋白的胞外區(qū)制備的抗體。
不同的實(shí)驗(yàn)方法對(duì)抗體結(jié)合抗原表位的要求不一樣，許多抗體僅能識(shí)別已還原和變性的蛋白質(zhì)，因?yàn)檫@樣露出了蛋白質(zhì)折疊形成的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)中隱藏起來(lái)的表位。另一方面，有些抗體僅能識(shí)別天然、折疊狀態(tài)的蛋白質(zhì)上的表位。
Elisa、IHC等實(shí)驗(yàn)方法通常要求抗體能識(shí)別空間表位或結(jié)構(gòu)表位，而WB實(shí)驗(yàn)則主要識(shí)別線(xiàn)性表位，能做WB實(shí)驗(yàn)的抗體不一定能應(yīng)用于elisa或IHC實(shí)驗(yàn)中，反之能用于Elisa、IHC的抗體不一定能應(yīng)用于WB。
目前大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板進(jìn)行重組蛋白或多肽抗原設(shè)計(jì)的，但抗體通?？膳c來(lái)自其它生物體的具有氨基酸序列高度同源性的相同靶蛋白反應(yīng)，我們可根據(jù)自己需要選擇具有合適種屬特異性的抗體。
2.通常我們認(rèn)為單克隆抗體的特異性?xún)?yōu)于多克隆抗體，而多抗的親和力優(yōu)于單抗，但如果抗原設(shè)計(jì)水平較高，多抗也能達(dá)到單抗的特異性水平。目前市面上主要以多抗為主，種屬來(lái)源主要是兔和山羊，而單抗主要有鼠單抗和兔單抗。
3.抗體作為免疫系統(tǒng)中最重要的分子之一，是一類(lèi)相對(duì)穩(wěn)定的蛋白，其穩(wěn)定性是自然進(jìn)化篩選的結(jié)果。大部分抗體4度短暫放置兩周仍具有一定的活性，作為商業(yè)化產(chǎn)品，我們往往加入50%無(wú)菌甘油，分裝成小支凍存于-20度（禁止凍存于-80度，此溫度低于甘油的冷凝點(diǎn)，溶液凍結(jié)會(huì)損害抗體活性），避免反復(fù)凍融，這樣可保證2年內(nèi)抗體都是有效的。最理想的抗體保存方式是在添加凍干保護(hù)劑的情況下對(duì)抗體進(jìn)行冷凍干燥處理，這樣的抗體可有效保存5-8年。
不同的實(shí)驗(yàn)方法對(duì)抗體結(jié)合抗原表位的要求不一樣，許多抗體僅能識(shí)別已還原和變性的蛋白質(zhì)，因?yàn)檫@樣露出了蛋白質(zhì)折疊形成的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)中隱藏起來(lái)的表位。另一方面，有些抗體僅能識(shí)別天然、折疊狀態(tài)的蛋白質(zhì)上的表位。
Elisa、IHC等實(shí)驗(yàn)方法通常要求抗體能識(shí)別空間表位或結(jié)構(gòu)表位，而WB實(shí)驗(yàn)則主要識(shí)別線(xiàn)性表位，能做WB實(shí)驗(yàn)的抗體不一定能應(yīng)用于elisa或IHC實(shí)驗(yàn)中，反之能用于Elisa、IHC的抗體不一定能應(yīng)用于WB。
目前大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板進(jìn)行重組蛋白或多肽抗原設(shè)計(jì)的，但抗體通?？膳c來(lái)自其它生物體的具有氨基酸序列高度同源性的相同靶蛋白反應(yīng)，我們可根據(jù)自己需要選擇具有合適種屬特異性的抗體。
2.通常我們認(rèn)為單克隆抗體的特異性?xún)?yōu)于多克隆抗體，而多抗的親和力優(yōu)于單抗，但如果抗原設(shè)計(jì)水平較高，多抗也能達(dá)到單抗的特異性水平。目前市面上主要以多抗為主，種屬來(lái)源主要是兔和山羊，而單抗主要有鼠單抗和兔單抗。
3.抗體作為免疫系統(tǒng)中最重要的分子之一，是一類(lèi)相對(duì)穩(wěn)定的蛋白，其穩(wěn)定性是自然進(jìn)化篩選的結(jié)果。大部分抗體4度短暫放置兩周仍具有一定的活性，作為商業(yè)化產(chǎn)品，我們往往加入50%無(wú)菌甘油，分裝成小支凍存于-20度（禁止凍存于-80度，此溫度低于甘油的冷凝點(diǎn)，溶液凍結(jié)會(huì)損害抗體活性），避免反復(fù)凍融，這樣可保證2年內(nèi)抗體都是有效的。最理想的抗體保存方式是在添加凍干保護(hù)劑的情況下對(duì)抗體進(jìn)行冷凍干燥處理，這樣的抗體可有效保存5-8年。
