1.什么是抗體?
抗體又稱(chēng)免疫球蛋白,由一種B細(xì)胞終末分化成的漿細(xì)胞所分泌,是血漿中γ球蛋白的主要構(gòu)成成分,被有機(jī)體免疫系統(tǒng)用來(lái)鑒別和中和外源物質(zhì),如細(xì)菌、病毒等有害微生物或花粉、灰塵等過(guò)敏原。這一特性是由其結(jié)構(gòu)特征決定的??贵w整個(gè)大分子呈Y型,由2條重鏈和2條輕鏈通過(guò)二硫鍵連接而成,每條鏈都包含一個(gè)高度保守的恒定域Fc區(qū)和一個(gè)可變域Fv區(qū)??贵wY型結(jié)構(gòu)的兩個(gè)分叉頂端都包含一個(gè)被稱(chēng)作抗原互補(bǔ)位(complementarity determining region,CDR)的鎖狀結(jié)構(gòu),該結(jié)構(gòu)在B細(xì)胞增殖分化過(guò)程中被篩選,每個(gè)單獨(dú)的漿細(xì)胞分泌的抗體該結(jié)構(gòu)只針對(duì)一種特定的抗原表位。形象的說(shuō),就像一把鑰匙僅能開(kāi)一把鎖一樣,一種抗體只能和一種抗原相結(jié)合,這種結(jié)合依賴(lài)于CDR區(qū)和抗原決定簇的結(jié)構(gòu)互補(bǔ),靠?jī)煞N分子多肽鏈間的氫鍵、范德華力、電荷作用和疏水作用結(jié)合在一起。基于這一特性,我們利用抗體來(lái)標(biāo)記或者示蹤我們感興趣的目標(biāo)分子。
2.抗體的用途
隨著生命科學(xué)的發(fā)展和人類(lèi)基因組計(jì)劃的完成,成千上萬(wàn)的未知蛋白進(jìn)入人們的視野,圍繞著蛋白展開(kāi)的研究越來(lái)越多,抗體試劑因其結(jié)合特異性和易于標(biāo)記酶、熒光素的特點(diǎn)在各種實(shí)驗(yàn)中的使用越來(lái)越廣泛。幾十年前,科學(xué)家們需要自己獨(dú)立完成所需要的抗體的制備,進(jìn)入上世紀(jì)90年代,生物公司開(kāi)始接手這項(xiàng)業(yè)務(wù),相關(guān)領(lǐng)域的研究飛速發(fā)展,各種成果競(jìng)相涌現(xiàn)。抗體在免疫性疾病治療和診斷中的應(yīng)用相繼被發(fā)明,由此也衍生出了現(xiàn)代多個(gè)抗體相關(guān)行業(yè),包括科研型抗體、治療性抗體藥物以及診斷性抗體試劑等。時(shí)至今日,科研抗體仍是目前應(yīng)用最基礎(chǔ)、廣泛的生物活性試劑之一,多種生物學(xué)研究領(lǐng)域隨處可見(jiàn)它的身影,如癌癥研究、心血管研究、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、神經(jīng)科學(xué)、免疫學(xué)研究、表觀(guān)遺傳學(xué)等。
抗體應(yīng)用 |
描述 |
酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA) |
不僅能夠?qū)μ囟ǖ牡鞍走M(jìn)行定量分析,還可以研究分子之間的相互作用或其他特性 |
蛋白質(zhì)印跡(WB) |
確定樣品間蛋白的相對(duì)表達(dá)水平 |
免疫組織化學(xué)(IHC) |
揭示了樣本內(nèi)抗原的組織特異性和亞細(xì)胞定位,在完整組織中對(duì)于蛋白表達(dá)的分析更有優(yōu)勢(shì) |
免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC) |
研究蛋白的亞細(xì)胞分布 |
流式細(xì)胞術(shù)和細(xì)胞分選(FACS) |
測(cè)量細(xì)胞某些化學(xué)和物理特性的一種手段 |
免疫沉淀(IP) |
分離純化單一或復(fù)合蛋白的最常用的一種方式??贵w被固定在固相基質(zhì)(如磁珠/瓊脂糖小球)上,從而從復(fù)雜溶液中捕獲抗原 |
染色質(zhì)免疫沉淀(ChIP) |
用來(lái)確定特定蛋白是否與體內(nèi)特定DNA序列相互作用 |