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發(fā)布時間：2024-05-11 14:44?? 咨詢量：
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產(chǎn)品詳情
| 名稱： | Annexin V-EGFP/PI Apoptosis Kit |
|---|---|
| 介紹： | Annexin V選擇性結(jié)合磷酯酰絲氨酸(phosphatidylserine，簡稱 PS)。磷酯酰絲氨酸主要分 布在細胞膜內(nèi)側(cè)，即與細胞漿相鄰的一側(cè)。在細胞發(fā)生凋亡的早期，不同類型的細胞都會把 磷酯酰絲氨酸外翻到細胞表面，即細胞膜外側(cè)。磷酯酰絲氨酸暴露到細胞表面后會促進凝血 和炎癥反應。而 Annexin V 和外翻到細胞表面的磷酯酰絲氨酸結(jié)合后可以阻斷磷酯酰絲氨酸的促凝血和促炎癥反應活性。可以使用流式細胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測設備進行檢測。染色過程僅需10分鐘。另外，該測定可以直接在活細胞上進行。EGFP比其他熒光試劑更亮，光穩(wěn)定性更高。當同時進行膜聯(lián)蛋白V-EGFP和PI染色時，該試劑盒可以區(qū)分凋亡與壞死。 |
| 貨號： | K018 |
| 規(guī)格： | 20T/50T/100T |
| 存儲： | 2-8°C for 12 months. Annexin V-EGFP and propidium iodide need to be stored away from light. |
| 試劑盒主要組成： | √ 檢測方法-流式細胞儀（Ex = 488 nm; Em = 530 nm）和熒光顯微鏡
√ 樣品類型-活細胞（懸浮細胞和粘附細胞） √ 種屬-哺乳動物 √ 試劑盒規(guī)格-25、100、400次試驗 √ 應用-檢測細胞凋亡的早期/中期；區(qū)分凋亡和壞死。 |
| 特點與優(yōu)勢： | √ 簡單的一步染色過程，只需10分鐘
√ 快速方便 √ EGFP是一種明亮且光穩(wěn)定的綠色熒光蛋白，當同時進行膜聯(lián)蛋白V-EGFP和PI染色時，該試劑盒可以區(qū)分凋亡與壞死 |
| 試劑盒組件： | √ 膜聯(lián)蛋白V-EGFP
√ 1X結(jié)合緩沖液 √ 碘化丙錠（PI） |
| 操作方案： | A.用膜聯(lián)蛋白V-EGFP孵育細胞
1.通過所需方法誘導細胞凋亡。 2.離心收集1-5 x 105個細胞。 3.將細胞重懸于500 μl 1X Binding Buffer中。 4.加入5 μl Annexin V-EGFP和5 μl碘化丙啶（PI 50μg / ml，可選）。 5.在黑暗中于室溫下孵育5分鐘。 根據(jù)分析方法，繼續(xù)下面的B或C。 B.流式細胞儀定量 使用FITC信號檢測器（通常為FL1）和藻紅蛋白發(fā)射信號檢測器（通常為FL2）進行PI染色，通過流式細胞術(shù)（Ex = 488 nm； Em = 530 nm）分析膜聯(lián)蛋白V-EGFP的結(jié)合。在與膜聯(lián)蛋白V-EGFP（步驟A.3-5）孵育之前，先用含血清的培養(yǎng)基一次。 C.通過熒光顯微鏡檢測 將步驟A.5中的細胞懸液放在載玻片上。用玻璃蓋玻片蓋住細胞。為了分析貼壁細胞，可直接在蓋玻片上培養(yǎng)細胞。孵育后（步驟A.5），將載玻片倒在載玻片上并觀察細胞。還可以在可視化之前將細胞清洗并固定在2％甲醛中 1.固定前必須將細胞與膜聯(lián)蛋白V-EGFP一起孵育，因為任何細胞膜破裂都可能導致膜聯(lián)蛋白V與細胞膜內(nèi)表面PS的非特異性結(jié)合 2.使用用于FITC和羅丹明的雙重濾光片組在熒光顯微鏡下觀察細胞。 結(jié)合膜聯(lián)蛋白V-EGFP的細胞在質(zhì)膜上會顯示綠色染色。失去膜完整性的細胞將在整個細胞核上顯示紅色染色（PI），并在細胞表面（質(zhì)膜）上顯示綠色染色的暈圈（EGFP）。 |
