服務(wù)熱線
15623758226
聯(lián)系方式
- 手機(jī)：15623758226
- 電話：027-65524773
- Q Q：3038053592
- 郵箱：3038053592@qq.com
- 地址：武漢東湖新技術(shù)開發(fā)區(qū)高新二路388號武漢光谷國際生物醫(yī)藥企業(yè)加速器1.2期C22棟一層、二層
發(fā)布時間：2024-05-11 14:33?? 咨詢量：
聯(lián)系客服 027-65524773
資料下載sales2@fn-test.com
產(chǎn)品詳情
| 名稱： | Annexin V-FITC Apoptosis Kit |
|---|---|
| 介紹： | Annexin V選擇性結(jié)合磷酯酰絲氨酸(phosphatidylserine，簡稱 PS)。磷酯酰絲氨酸主要分 布在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，即與細(xì)胞漿相鄰的一側(cè)。在細(xì)胞發(fā)生凋亡的早期，不同類型的細(xì)胞都會把 磷酯酰絲氨酸外翻到細(xì)胞表面，即細(xì)胞膜外側(cè)。磷酯酰絲氨酸暴露到細(xì)胞表面后會促進(jìn)凝血 和炎癥反應(yīng)。而 Annexin V 和外翻到細(xì)胞表面的磷酯酰絲氨酸結(jié)合后可以阻斷磷酯酰絲氨酸的促凝血和促炎癥反應(yīng)活性?？梢允褂昧魇郊?xì)胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測設(shè)備進(jìn)行檢測。染色過程僅需10分鐘。當(dāng)同時進(jìn)行膜聯(lián)蛋白V-FITC和PI染色時，該試劑盒可以區(qū)分凋亡和壞死。 |
| 貨號： | K019 |
| 存儲： | 4°攝氏度 |
| 試劑盒主要組成： | √ 檢測方法-流式細(xì)胞儀（Ex = 488 nm; Em = 530 nm）和熒光顯微鏡
√ 樣品類型-活細(xì)胞（懸浮細(xì)胞和粘附細(xì)胞） √ 種屬-哺乳動物 √ 試劑盒規(guī)格-25、100、400次試驗 √ 應(yīng)用-檢測細(xì)胞凋亡的早期/中期；區(qū)分凋亡和壞死。 |
| 特點(diǎn)與優(yōu)勢： | √ 簡單的一步染色過程，只需10分鐘
√ 快速方便 √ EGFP是一種明亮且光穩(wěn)定的綠色熒光蛋白，當(dāng)同時進(jìn)行膜聯(lián)蛋白V-FITC和PI染色時，該試劑盒可以區(qū)分凋亡與壞死 |
| 試劑盒組件： | √ 膜聯(lián)蛋白V-FITC
√ 1X結(jié)合緩沖液 √ 碘化丙錠（PI） |
| 操作方案： | A.用膜聯(lián)蛋白V- FITC孵育細(xì)胞
1.通過所需方法誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。 2.離心收集1-5 x 105個細(xì)胞。 3.將細(xì)胞重懸于500 μl 1X Binding Buffer中。 4.加入5 μl Annexin V-EGFP和5 μl碘化丙啶（PI 50μg/ml，可選）。 5.在黑暗中于室溫下孵育5分鐘。 根據(jù)分析方法，繼續(xù)下面的B或C。 B.流式細(xì)胞儀定量 使用FITC信號檢測器（通常為FL1）通過流式細(xì)胞儀（Ex = 488 nm; Em = 530 nm）分析膜聯(lián)蛋白V-FITC結(jié)合，并通過PI染色進(jìn)行PI染色藻紅蛋白發(fā)射信號檢測器（通常為FL2）。對于粘附細(xì)胞，在與膜聯(lián)蛋白V-FITC（步驟A.3-5）孵育之前，輕輕地用胰蛋白酶消化并用含血清的培養(yǎng)基洗滌一次。 C.通過熒光顯微鏡檢測 將步驟A.5中的細(xì)胞懸液放在載玻片上。用玻璃蓋玻片蓋住細(xì)胞。為了分析貼壁細(xì)胞，可直接在蓋玻片上培養(yǎng)細(xì)胞。孵育后（A.5），將載玻片倒在載玻片上并觀察細(xì)胞。還可以在可視化之前將細(xì)胞洗滌并固定在2％甲醛中。（固定前必須將細(xì)胞與膜聯(lián)蛋白V-FITC一起孵育，因為任何細(xì)胞膜破裂都會導(dǎo)致膜聯(lián)蛋白V與細(xì)胞膜內(nèi)表面PS的非特異性結(jié)合。） 使用用于FITC和羅丹明的雙重濾光片組在熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞。結(jié)合膜聯(lián)蛋白V-FITC的細(xì)胞在質(zhì)膜上會顯示綠色染色。失去膜完整性的細(xì)胞將在整個核中顯示紅色染色（PI），并在細(xì)胞表面（質(zhì)膜）上顯示綠色染色的暈圈（FITC）。 |
