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Bradford蛋白質(zhì)測(cè)定試劑盒

  • Assay試劑盒
  • 發(fā)布時(shí)間:2020-10-15 11:42?? 咨詢量:
  • 英文名稱:Bradford Protein Assay Kit
  • 產(chǎn)品貨號(hào):K002
  • 簡(jiǎn)介:菲恩生物Bradford蛋白質(zhì)測(cè)定試劑盒依賴于染色考馬斯亮藍(lán)G250與酸性介質(zhì)中蛋白質(zhì)的結(jié)合,具有高度的敏感性和易用性,已為實(shí)驗(yàn)室和公司所采用,已成為現(xiàn)有和BCA測(cè)定法一樣的蛋白質(zhì)定量方法之一。
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    產(chǎn)品詳情
    名稱:Bradford Protein Assay Kit
    介紹:Bradford蛋白定量法依賴于染色考馬斯亮藍(lán)G250與酸性介質(zhì)中蛋白質(zhì)的結(jié)合,并且該絡(luò)合物在595nm處表現(xiàn)出最大吸光度,該吸光度在較寬的工作范圍內(nèi)隨蛋白質(zhì)濃度的增加幾乎呈線性關(guān)系。Bradford蛋白測(cè)定法具有高度的敏感性和易用性,已為實(shí)驗(yàn)室和公司所采用,已成為現(xiàn)有和BCA測(cè)定法一樣的蛋白質(zhì)定量方法之一。
    菲恩生物Bradford蛋白質(zhì)檢測(cè)試劑盒具有靈敏度高,背景淺且色差顯著的特點(diǎn),并且在低濃度蛋白質(zhì)下也可以直觀,方便的檢測(cè)。
    貨號(hào):K002
    存儲(chǔ):該套件應(yīng)避光,并在20℃下以便長(zhǎng)期保存。為了獲得最佳測(cè)試靈敏度,應(yīng)先將套件加熱室溫。
    套件組分:
    套件組分 存儲(chǔ)
    測(cè)量次數(shù)   500 2500  
    工作試劑 100ml(毫升) 500ml(毫升) 室溫
    牛血清白蛋白(5毫克/毫升) 2ml(毫升) 10ml(毫升) -20°C

    操作步驟:96微孔板程序
    1.準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)試劑。將5 mg / ml BSA標(biāo)準(zhǔn)品稀釋為側(cè)面濃度0、0.25、0.5、0.75、1、1.5 mg / ml。BSA稀釋液可冷凍保存于-20℃,使用時(shí)解凍并加熱至室溫。
    2.用標(biāo)準(zhǔn)或測(cè)試標(biāo)記孔。向每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)孔中至少添加10 μl稀釋的標(biāo)準(zhǔn)試劑,并在每個(gè)測(cè)試孔中添加等體積的測(cè)試樣品。
    3.加入所有含有200 μl工作試劑的孔,并輕輕搖晃以進(jìn)行混合。
    4.在酶標(biāo)儀上測(cè)量595 nm處的吸光度。減去至少3個(gè)空白孔的平均吸光度讀數(shù)。通過繪制每種BSA標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度讀數(shù)與其濃度的關(guān)系來繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。使用標(biāo)準(zhǔn)曲線確定每個(gè)未知樣品的蛋白質(zhì)濃度。
    試管程序
    1.準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)試劑。將5 mg / ml BSA標(biāo)準(zhǔn)品稀釋為側(cè)面濃度0、0.25、0.5、0.75、1、1.5mg / ml。BSA稀釋液可冷凍保存于–20℃,使用時(shí)解凍并加熱至室溫。
    2.用標(biāo)準(zhǔn)或測(cè)試標(biāo)記管。將至少30 μl稀釋的標(biāo)準(zhǔn)試劑加到每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管中,并在每個(gè)測(cè)試管中加入等體積的測(cè)試樣品。
    3.將所有試管加入1 ml工作試劑,然后輕輕搖晃以進(jìn)行混合。
    4.用分光光度計(jì)測(cè)量595 nm處的吸光度。減去至少3個(gè)空白試管的平均吸光度讀數(shù)。通過繪制每種BSA標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度讀數(shù)與其濃度的關(guān)系來繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。使用標(biāo)準(zhǔn)曲線確定每個(gè)未知樣品的蛋白質(zhì)濃度。
    注意事項(xiàng):1.盡管在4℃下儲(chǔ)存的試劑很少沉淀,但是少量沉淀是可以接??受的,并且可以通過上下顛倒來解決。
    2.Bradford蛋白定量法的試劑是強(qiáng)酸的。出于安全考慮,請(qǐng)?jiān)诜治鲞^程中穿上實(shí)驗(yàn)服和手套。Bradford蛋白質(zhì)測(cè)定試劑盒不耐受清潔劑。如果必須使用清潔劑,則可以使用菲恩生物產(chǎn)品菲恩生物BCA蛋白測(cè)定試劑盒(K001)。
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