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發(fā)布時(shí)間：2020-10-15 11:43?? 咨詢量：
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產(chǎn)品詳情
| 名稱： | BCA Protein Assay Kit | ||||||||||||||||||||||||||||||
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| 介紹： | BCA蛋白測定法是一種基于雙辛丁酸（BCA）的蛋白測定制劑，用于比色檢測。此方法結(jié)合了在堿性介質(zhì)中蛋白質(zhì)將二價(jià)銅離子還原為一價(jià)銅離子（縮二脲反應(yīng)）和一價(jià)銅離子與BCA絡(luò)合形成的可溶性紫色反應(yīng)產(chǎn)物。這種紫色復(fù)合物在562 nm處表現(xiàn)出最大吸光度，在較大的工作范圍（0-2 mg / ml）中，隨著蛋白質(zhì)濃度的增加，吸光度幾乎呈線性。由于BCA蛋白測定法具有高度的敏感性和易用性，已被實(shí)驗(yàn)室和公司所采用，并已成為現(xiàn)有的蛋白質(zhì)定量方法和Bradford測定法之一。
菲恩生物的BCA蛋白測定試劑盒具有高靈敏度和背景淺的特點(diǎn)，測量范圍可達(dá)3 mg / ml。 | ||||||||||||||||||||||||||||||
| 貨號： | K001 | ||||||||||||||||||||||||||||||
| 存儲(chǔ)： | 該試劑盒可以在-20℃下長期保存，并在使用前加熱到室溫，以達(dá)到最佳的測試靈敏度。 | ||||||||||||||||||||||||||||||
| 套件組分： |
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| 步驟說明： | 96微孔板程序
1.準(zhǔn)備工作試劑。將工作試劑（黃綠色透明液體）與試劑A和試劑B以50：1的比例混合。 2.準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)試劑。將5 mg / ml BSA標(biāo)準(zhǔn)品稀釋為0、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2 mg / ml的橫向濃度。牛血清白蛋白稀釋液可以冷凍保存在-20℃，使用時(shí)解凍并溫?zé)嶂潦覝亍? 3.用標(biāo)準(zhǔn)或測試標(biāo)記孔。向每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)孔中至少添加20 μl稀釋的標(biāo)準(zhǔn)試劑，并在每個(gè)測試孔中添加等體積的測試樣品。 4.加入所有孔，加入200 μl工作試劑，在37℃孵育30分鐘。 5.在酶標(biāo)儀上測量562 nm處的吸光度。減去至少3個(gè)空白孔的平均吸光度讀數(shù)。通過繪制每種BSA標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度讀數(shù)與其濃度的關(guān)系來繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。使用標(biāo)準(zhǔn)曲線確定每個(gè)未知樣品的蛋白質(zhì)濃度。 試管程序 1準(zhǔn)備工作試劑。將工作試劑（黃綠色透明液體）與試劑A和試劑B以50：1的比例混合。 2.準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)試劑。將5 mg / ml BSA標(biāo)準(zhǔn)品稀釋為0、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2 mg / ml的橫向濃度。牛血清白蛋白稀釋液可以冷凍保存在-20℃，使用時(shí)解凍并溫?zé)嶂潦覝亍? 3.用標(biāo)準(zhǔn)或測試標(biāo)記管。將至少50 μl稀釋的標(biāo)準(zhǔn)試劑添加到每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管中，并在每個(gè)測試管中添加等體積的測試樣品。 4.將所有試管加入1 ml工作試劑，于37℃孵育30分鐘。 5.用分光光度計(jì)測量562 nm處的吸光度。減去至少3個(gè)空白試管的吸光度平均讀數(shù)。通過繪制每種BSA標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度讀數(shù)與其濃度的關(guān)系來繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。使用標(biāo)準(zhǔn)曲線確定每個(gè)未知樣品的蛋白質(zhì)濃度。 | ||||||||||||||||||||||||||||||
| 附加測試信息： | 1.如果沒有足夠的孵育時(shí)間，則可將混合試劑通過微波加熱至20秒。為防止劇烈沸騰，應(yīng)將混合后的試劑分別加熱兩次10秒兩次，并在加熱縫隙中輕輕晃動(dòng)。
2.使用已知濃度的相同蛋白質(zhì)制備標(biāo)準(zhǔn)試劑可以提高濃度確定的準(zhǔn)確性，例如，用BSA的標(biāo)準(zhǔn)試劑確定血清蛋白的濃度，或用IgG的標(biāo)準(zhǔn)試劑確定抗體的濃度。 | ||||||||||||||||||||||||||||||
| 注意事項(xiàng)： | 1.試劑A是淺黃色透明液體。丟棄已經(jīng)變色或沉淀的試劑A。
2.BCA測試的試劑具有輕微的毒性和堿性。檢測是請穿實(shí)驗(yàn)服和手套。 3.BCA蛋白分析試劑盒容易受還原劑或金屬螯合劑影響。如果不可避免地需要這些試劑，則可以使用Fine生物的產(chǎn)品Bradford蛋白質(zhì)測定試劑盒（K002）。 | ||||||||||||||||||||||||||||||
